RGS4和D2受体信号通路相关分子在甲基苯丙胺依赖CPP大鼠纹状体的表达变化
蒙国懿，何繁漪，隋念含，赵林波，洪仕君，邢豫明，赵永娜
（昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室，法医学院，昆明650500，云南；云南省公安厅禁毒处毒品技术公安部重点实验室，昆明650228，云南）
[摘 要]
目的：研究甲基苯丙滕（methamphetamine,METH）依赖条件性位直偏爱（conditioned place prefence, CPP）实验大鼠纹状体 G 蛋白信号调节因子 4(regulator of G-protein signal 4, RGS4）和多巴胺 D2受体（dopamine receptor D2）信号通路相关分子的表达变化。方法：建立 METH 依赖 CPP 大鼠 1 周组、2 周组，应用蛋白质印迹（West­ern blot）测定各组大鼠纹状体 RGS4 和 D2、抑制性 G 蛋白 α 亚基（inhibitory G protein α-subunit, Gαi）、丝裂原激活的蛋白激酶（mitogen-actiyatd protein kinase, MAPK）蛋白表达的变化；应用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent as­say, ELISA）测定各组大鼠纹状体环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate, cAMP）含量的变化。结果：与生理盐水对照组相比，METH 依赖 1 周组、2 周组大鼠在伴药箱的平均停留时间明显延长（P<0.05）。与生理盐水对照组相比，RGS4 蛋白在 METH 依赖1周、2周组的表达均明显下降(P<0.01），且与 METH 依赖 1 周组相比，2 周组的下降更为明显（P<0.05）... ...
[药品及主要试剂]
甲基苯丙脏药片由合作单位云南省公安厅禁毒处毒品分析与禁毒技术公安部重点实验室合法提供；水合氯醛，购自天津市科密欧化学试剂有限公司；BCA 蛋白浓度测定试剂盒，购自北京天根生化公司；预染蛋自 maker0671，购自Fermentas公司；ECL 化学发光检测试剂，购自Thermo公司；一抗：鼠抗D2单克隆抗体，购自美国abgent公司；兔抗Gαi 单克隆抗体，购自由abcam公司；兔抗MAPK单克隆抗体，购自美国Cell Signaling公司；兔抗RGS4多克隆抗体，购自美国 abgebt公司；兔抗自β－actin单克隆抗体，购自美国SAB公司；二抗：HRP标记的羊抗兔二抗，购自美国Cell Signaling公司；HRP标记的羊抗鼠二抗，购自美国Cell Signaling公司；大鼠cAMP酶联免疫分析试剂盒，购自上海江莱生物公司 [1]... ...
[METH 依赖 CPP 大鼠缺状体 RGS4、D2、Gαi、MAPK 蛋自表达的变化]
与生理盐水对照组相比，METH 依赖 1 周组、2 周组 RGS4 蛋白表达均明显下调（P<0.01）； 且与 METH 依赖 1 周组相比，2 周组的下调更为明显 （P<0.05）。METH 依赖 CPP 大鼠纹状体中 D2、Gαi 、MAPK 蛋白的表达，与生理盐水对照组相比，METH 依赖 1 周组、2 周组 D2、Gαi 、MAPK 蛋白表达均明显上调（P<0.01），且与 METH 依赖 1 周组相比，2 周组的上调更为明显，差异有统计学意义（P<0.05），见Fig.1
[参考文献]
[ 1 ] UNODC. World Drog Report 2012 [ M ]. United NaChin J Clin Pharmacol Ther 2017 Dec ;22(12 )
tions publication , Sales No. E. 12. XI. 1, 2012
[ 2 ] Grant KM，Levan，Wells SM，et al. Methamphet­ amine Associated Psychosis [ J ]. J Neumimmune Pharmacol, 2012 , 7(1) :113-139.
[ 3 ] Maryam R , Effat R , Nasrin II, et al. Effect of electrical stimulation of nucleus accumhens with low, median and high currents intensities on conditioned place pref erence induced by morphine in rats [ J ]. Adv Biomed Res 2014, 3 : 14.
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[备 注] [1]“江莱生物”10年以来一直致力于免疫学技术的积累与沉淀，目前江莱生物实验室占地约3000平米，技术研发团队50余人，配备了全球最先进的分析和检测设备，我们通过自主创新以及与国内外的科研单位合作研发，不断突破新技术，目前我们研发了上千种指标，质量成熟，并长期出口到欧美市场，赢得了众多科研机构的认可 ...
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