阳性对照品（positive control）和阴性对照品（negative control）是检验实验有效性的控制品，同时也作为判断结果的对照，因此对照品，特别是阴性对照品的基本组成应尽量与检测标本的组成相一致。以人血清为标本的测定，对照品最好也为人血清，因为正常人血清在各种elisa模式中可产生不同程度的本底。由于大量正常人血清较难得到，国外elisa试剂盒中的对照品多以复钙人血浆（recalcified human plasma）为原料，即在血浆中加入钙离子，使其中的纤维蛋白质凝固，除去凝块后所得的液体，其组成与血清相似。
阴性对照品须现行检测，确定其中不含待测物质。例如检测HBsAg的阴性对照品中不可含HBsAg，最好抗HBs也是阴性。阳性对照品多以含蛋白保护剂的缓冲液为基质，其中加入一定量的待检物质，此量最好在Elisa试剂盒说明书中标明。加入的量应与试剂的敏感度相称，在测定中得到的吸光值与受检的标本吸光值比较，可对标本中受检物质的量有一个粗略的估值。检测HBsAg的elisa试剂盒检测敏感度约为0.5ng/ml，阳性对照品中HBsAg含量约为10ng/ml。在对照品中一般加入抗生素和防腐剂，以利保存。
定量测定的elisa试剂盒应含有制作标准曲线用的参考标准品，应包括覆盖可检测范围的4-5个浓度，一般均配入含蛋白保护剂及防腐剂的缓冲液中。