轮状病毒酶联免疫吸附试验试剂盒
Rota virus enzymes linked immunosorbent assay reagent kit
主要性状
Rota-Elisa试剂盒是用于检测人和动物粪便中轮状病毒的,仅作分群用。Rota-Elisa试剂盒保存于2-8℃,效期暂定为半年。
基本原理
酶联免疫吸附试验也称酶标记法,是酶免疫分析法的一种。如果酶免疫分析在固相中进行,称为固相酶免疫分析;在液相中进行,称为液相酶免疫分析。本试剂盒属固相酶免疫分析之一。基本原理是将可溶性抗原(或抗体)吸附在固相载体上,使免疫反应在固相支持物上进行。再结合酶标记抗体(或抗原),利用检测酶分解底物的量的差异来定量检测相应的抗原(或抗体)。此法的基本要求是:1.抗原或抗体能牢固吸附于固相载体的表面且保持其免疫活性;2.抗原或抗体与酶连接所形成的结合物应既有免疫学特异性又具有酶活性;3.底物被酶分解,形成可溶性稳定的有色产物。测定抗体时,将抗原吸附到固相载体上,然后与检测样品中的抗体反应,在固相载体上形成抗原抗体复合物,再与酶标记的抗体(抗免疫球蛋白)反应,检测样品中与抗原结合的抗体,底物被酶分解,出现颜色反应,其显色的深浅与样品中相应抗体量成正比。测定抗原时,先将特异性抗体吸附于固相载体,加入待检抗原后,再用酶标记的抗体(与吸附在固相载体上的抗体相同)检测样品中的抗原,加入底物所出现的颜色改变与待测的抗原量成正比。
Rota-Elisa试剂盒采用直接法elisa,其简单流程如下:
1、轮状病毒IgG(抗体)包被,洗。
2、加待检粪样(抗原),洗。
3、加轮状病毒IgG-酶结合物,洗。
4、加底物。
5、终止反应,判定结果。
结果判定
准确的判断应使用分光光度计,光密度值越大,则阳性反应越强。待检标本的判定以P/N比值计算:
P/N=(待检标本光密度值-空白底物对照光密度值) / (阴性标本对照光密度值-空白底物对照光密度值)
P/N比值大于3.0,待检标本为阳性;P/N比值为2.0-3.0,待检标本为可疑;P/N比值小于2.0,待检标本为阴性。