一种夹心斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)开发的犬瘟热病毒(CDV)检测试剂盒。56只怀疑有CD在血淋巴细胞和睑结膜用斑点ELISA和酶联免疫吸附样品的CDV抗原检测阳性率,分别为,91%(49/54)和81%(44/54)的细胞样品和88%(28/32)和75%(24/32)的结膜样本。犬瘟热病毒的检测限分别为10 ng / L 50μDot-ELISA和40 ng / L 50μELISA。斑点酶联免疫吸附相对于电子显微镜的可靠性为96%,22的样本:所有的21个样本中,犬瘟热病毒颗粒的电子显微镜观察了用斑点ELISA阳性结果;以单颗粒物样品中未观察到产生假阳性结果,用斑点ELISA。结果表明Dot-ELISA开发可以作为一个可靠的快速诊断测试的CD疑似病例,也可用于该病的流行病学监测
简介
犬瘟热(CD)是一种传染性极强的疾病,影响所有年龄的狗。全球范围内它具有很高的发病率和死亡率。犬瘟热病毒(CDV),副粘病毒科的一个成员,麻疹病毒属,导致在中枢神经系统的急性全身性感染或慢性局限性和持续性感染。受感染的狗都在初始阶段的疾病的犬瘟热或癫痫样抽搐的卡他性形式。由于病毒具有很强的传染性和感染的死亡率很高,饲养狗患犬瘟热病毒感染最严重的经济损失。
评估抗体状态的血清学检测已被用于临床CD。然而,只有一个低的抗体反应可以在最初的几周后检测到感染。此外,许多小狗与母源抗体和疫苗接种的狗可能有高滴度的中和抗体。因此,中和抗体的检测是不完全可靠的诊断为CD,和更多的关注已支付的CDV抗原的检测。检测犬瘟热病毒在受感染的狗是病毒分离的最可靠的方法;然而,该方法是费时和经常不成功,当感染不是在急性期。其他实验室的工具,如染色包涵体和荧光抗体试验,亚急性或慢性的情况下也产生负面的结果。酶联免疫吸附试验(ELISA)使用蛋白质和单克隆抗体,免疫层析试验,和免疫捕获ELISA来检测犬瘟热病毒在细胞培养和临床标本。他们都有很高的特异性和敏感性;最近,通过逆转录聚合酶链反应检测CDV核衣壳蛋白基因(PCR)和实时定量PCR已被开发。这些方法只能在配备实验室进行。快速、灵敏的实验室和现场的CDV感染诊断的测试CD控制是必不可少的。
夹心斑点ELISA(Dot-ELISA)是一个敏感和特异的检测各种病毒抗原,具有广泛的临床诊断应用技术。目的是建立一种快速、敏感的实验室和现场的CDV感染的诊断测试。研究结果表明,基于斑点ELISA具有可靠性的效果,单克隆抗体,操作简单,重现性好。